TRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401467-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para THRB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRβ1 Anticorpo (J51): sc-737
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
THRB codifica o receptor beta do hormônio tireoidiano (TRβ), um receptor nuclear ativado por ligante que se liga à triiodotironina (T3) e regula a transcrição por meio de elementos de resposta ao hormônio tireoidiano. O TRβ coordena programas que controlam o metabolismo celular, a atividade mitocondrial, a homeostase de lipídios e colesterol, a termogênese e a diferenciação, por meio de interação com RXR via heterodimerização e recrutamento de correaguladores. A atividade de THRB integra-se à sinalização endócrina e a redes transcricionais que moldam estados de desenvolvimento e metabólicos específicos de cada tecido. A desregulação da sinalização de THRB ou da função do receptor está associada a alterações na responsividade aos hormônios tireoidianos e tem sido estudada em contextos de desequilíbrio metabólico e de reprogramação transcricional oncogênica.
TRβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus THRB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de THRB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função THRB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com THRB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.