TPX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402581

Visão geral

TPX2 (targeting protein for Xklp2) codifica uma proteína associada a microtúbulos essencial para a montagem e a manutenção do fuso mitótico, incluindo a nucleação de microtúbulos dependente de Ran-GTP ao redor dos cromossomos e a ativação/localização da quinase Aurora A nos polos do fuso. A TPX2 sustenta a integridade do centrossomo, a formação das fibras do cinetócoro e a segregação cromossômica precisa, vinculando-se a vias de progressão do ciclo celular e de estabilidade genômica. A expressão desregulada de TPX2 está frequentemente associada a fenótipos proliferativos e instabilidade cromossômica em contextos relacionados ao câncer, tornando-a um marcador amplamente utilizado e um nó mecanístico em estudos de sinalização mitótica. Assim, a TPX2 humana é relevante para investigar a função do checkpoint do fuso, a aneuploidia e mecanismos de vulnerabilidade impulsionados pela mitose em modelos de pesquisa biomédica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TPX2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TPX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TPX2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TPX2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TPX2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TPX2 para a investigação da sinalização de TPX2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TPX2 críticos para a função TPX2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TPX2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TPX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TPX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TPX2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TPX2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TPX2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TPX2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TPX2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.