TPPP3 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-405113-LAC

TPPP3 (membro 3 da família de proteínas promotoras da polimerização da tubulina) codifica uma proteína associada a microtúbulos, implicada na regulação da polimerização de microtúbulos, na organização do citoesqueleto e no transporte intracelular. Por meio de efeitos na dinâmica dos microtúbulos, a TPPP3 pode influenciar processos como a função do fuso mitótico, a polaridade celular e o comportamento migratório, que estão intimamente acoplados ao controle do ciclo celular e a programas de diferenciação epitelial. Alterações na expressão de TPPP3 têm sido relatadas em múltiplos contextos de câncer, sustentando sua utilidade como marcador molecular para estudar o estado de células tumorais, a proliferação e a remodelação do citoesqueleto. Essas propriedades tornam a TPPP3 um alvo relevante para investigar vias dependentes de microtúbulos e a mudança de fenótipo em modelos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TPPP3 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TPPP3 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TPPP3 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TPPP3, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TPPP3. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TPPP3 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.