Towbin, without SDS, 10X

O tampão Towbin, 10X, sem SDS (dodecil sulfato de sódio), é um reagente essencial na investigação em biologia molecular, utilizado principalmente em técnicas de análise de proteínas, como PAGE nativo (eletroforese em gel de poliacrilamida) e determinados métodos de transferência de proteínas. Este tampão desempenha um papel fundamental na manutenção da estrutura e carga nativas das proteínas, permitindo a sua separação com base no tamanho ou carga sem desnaturação. A composição do tampão de Towbin, 10X, inclui normalmente base Tris e glicina. A base Tris serve como agente tampão, mantendo um ambiente de pH estável propício à eletroforese. A glicina melhora a resolução da separação ao proporcionar um efeito de gradiente no gel. Na investigação, o Tampão Towbin, 10X, é crucial para a preparação de amostras, particularmente quando se pretende preservar a estrutura nativa e a carga das proteínas. Ao contrário dos tampões contendo SDS, o tampão Towbin sem SDS não desnatura as proteínas nem rompe as ligações dissulfureto. Em vez disso, proporciona um ambiente onde as proteínas mantêm as suas estruturas terciárias e quaternárias. Os cientistas utilizam o tampão Towbin, 10X, sem SDS, em técnicas como PAGE nativo para separar as proteínas com base no seu tamanho e carga, preservando as suas conformações nativas. Isto é particularmente útil para estudar complexos proteicos, oligómeros ou proteínas com estruturas tridimensionais complexas. Além disso, o tampão Towbin, 10X, sem SDS, é utilizado em determinados métodos de transferência de proteínas, tais como sistemas de transferência semi-secos ou baseados em tanques. Nestes métodos, as proteínas são transferidas de um gel para uma membrana mantendo a sua estrutura nativa, permitindo a deteção ou análise subsequente sem a necessidade de etapas de renaturação da proteína.