Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Tom1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423467-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Tom1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Tom1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Tom1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tom1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Tom1 Anticorpo (H-5): sc-514430
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Tom1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Tom1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Tom1** de camundongo (alvo de **Myb1**) codifica uma proteína adaptadora endossomal que se liga à ubiquitina e recruta a maquinaria associada ao **ESCRT** para regular o tráfego e a triagem de proteínas de membrana ubiquitinadas. Por meio de interações com a clatrina e componentes endossomais, a TOM1 contribui para a maturação dos endossomos, a degradação de cargas e o controle do turnover de receptores, influenciando assim a amplitude e a duração da sinalização. A TOM1 também tem sido associada à modulação de vias de sinalização inflamatórias, incluindo a regulação do eixo **IL-1/TLR** por meio do tráfego de complexos de sinalização. O transporte endolisossomal desregulado e a sinalização imune inata são relevantes para mecanismos de doenças neurodegenerativas e imunomediadas, tornando **Tom1** um locus útil para dissecar vias em modelos celulares.
Tom1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tom1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tom1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tom1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tom1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.