TOCA-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408893-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TOCA-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TOCA-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TOCA-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FNBP1L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TOCA-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TOCA-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FNBP1L codifica a TOCA-1, um adaptador contendo domínios F-BAR e SH3 que acopla a deteção da curvatura da membrana à remodelação do citoesqueleto de actina. A TOCA-1 coordena o recrutamento e a ativação, dependentes de Cdc42, de N-WASP e do complexo Arp2/3, sustentando a endocitose mediada por clatrina, o tráfego vesicular e a formação de estruturas dinâmicas de actina, como filopódios e invadopódios. Por meio desses processos, a TOCA-1 contribui para a polaridade celular, a migração e a sinalização dependente de adesão em vias ligadas às GTPases da família Rho e à regulação da actina cortical. A desregulação da dinâmica de actina associada à TOCA-1 tem sido estudada em contextos como alterações da motilidade celular e do comportamento invasivo, tornando o FNBP1L um alvo útil para estudos mecanísticos do controlo do citoesqueleto.
TOCA-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FNBP1L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FNBP1L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FNBP1L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FNBP1L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.