TNP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423464
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TNP2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TNP2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TNP2 Anticorpo (B-2): sc-393843
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TNP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423464 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Tnp2** codifica a **proteína de transição 2 (TNP2)**, um fator de remodelação da cromatina específico de espermatozoides que substitui as histonas durante a espermiogênese tardia e facilita a subsequente incorporação de protaminas para uma compactação estável do DNA. Essa proteína participa do programa coordenado de troca de histonas por protaminas, sustentando a condensação nuclear, a integridade do genoma e a morfologia adequada da cabeça do espermatozoide. A disrupção de **Tnp2** perturba a dinâmica de empacotamento da cromatina e pode levar a prejuízos na maturação espermática e a fenótipos de fertilidade masculina reduzida. Como modelo, a **TNP2** de camundongo é amplamente utilizada para estudar a reprogramação epigenética, o silenciamento transcricional pós-meiótico e a regulação da arquitetura da cromatina em células germinativas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TNP2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnp2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnp2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnp2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TNP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnp2 para a investigação da sinalização de TNP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnp2 críticos para a função TNP2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnp2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TNP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TNP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnp2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TNP2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TNP2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnp2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnp2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.