TNFα-IP 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423435

Visão geral

Tnfaip2 codifica a proteína 2 induzida por TNFα (TNFα-IP 2), um fator responsivo a citocinas implicado na sinalização inflamatória e na remodelação do comportamento celular durante a ativação imune. Sua expressão é induzida a jusante de TNFα/NF-κB e vias relacionadas, e tem sido associada à regulação da dinâmica do citoesqueleto, do tráfego de membranas e da migração em contextos mieloides e endoteliais. Em sistemas murinos, a TNFα-IP 2 é frequentemente usada como um indicador de programas transcricionais pró-inflamatórios e como um nó que conecta sinais da imunidade inata a mudanças em adesão e motilidade. A desregulação de sinalização associada à TNFα-IP 2 tem sido estudada no contexto de inflamação crônica e da biologia do microambiente associado a tumores, sustentando sua utilidade para dissecar a comunicação cruzada entre inflamação e câncer sem implicar desfechos clínicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TNFα-IP 2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfaip2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfaip2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfaip2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TNFα-IP 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfaip2 para a investigação da sinalização de TNFα-IP 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfaip2 críticos para a função TNFα-IP 2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfaip2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TNFα-IP 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TNFα-IP 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfaip2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TNFα-IP 2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TNFα-IP 2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfaip2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfaip2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.