TMPRSS11E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412014

Visão geral

TMPRSS11E codifica uma protease serina transmembranar do tipo II, expressa em superfícies epiteliais, onde a proteólise pericelular pode regular a função da barreira mucosa, as interações célula–célula e a remodelação do microambiente extracelular. Como parte da família TTSP, a TMPRSS11E está em posição de influenciar a sinalização ativada por proteases e eventos de processamento proteolítico que moldam a diferenciação epitelial e as respostas inflamatórias. A atividade desregulada de proteases epiteliais tem sido associada à fisiopatologia das vias aéreas e de epitélios escamosos, tornando a TMPRSS11E um alvo relevante para estudar os mecanismos subjacentes às respostas ao estresse epitelial e à remodelação tecidual. Sua arquitetura de protease ancorada à membrana permite investigar redes de proteases compartimentalizadas na superfície celular e seu impacto em programas de sinalização a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TMPRSS11E (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TMPRSS11E em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TMPRSS11E, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TMPRSS11E na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TMPRSS11E.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TMPRSS11E para a investigação da sinalização de TMPRSS11E, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TMPRSS11E críticos para a função TMPRSS11E
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TMPRSS11E para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TMPRSS11E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TMPRSS11E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TMPRSS11E. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TMPRSS11E Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TMPRSS11E (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TMPRSS11E para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TMPRSS11E definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.