TMEM132C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431553

概要

Tmem132c は、細胞膜に局在すると予測される多回膜貫通型タンパク質 TMEM132C をコードしており、細胞表面の構築や膜関連シグナル伝達に寄与すると考えられています。TMEM132 ファミリーのメンバーは細胞接着や細胞骨格ダイナミクスの制御との関連が報告されており、組織構築や神経系／上皮の恒常性における役割が示唆されます。マウスにおける Tmem132c の発現パターンは、膜タンパク質が発生過程および成体生理における細胞間連結性やストレス応答をどのように調節するかを検討する上で有用です。膜貫通型の接着／シグナル伝達モジュールの制御異常は、神経生物学や複雑疾患の遺伝学研究でしばしば扱われるため、TMEM132C は機序解明のための経路解析に適した標的となります。

TMEM132C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTmem132c遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tmem132c内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tmem132cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM132Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM132Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tmem132c欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM132Cの機能に不可欠なTmem132cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tmem132cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM132C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTMEM132C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tmem132c遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM132C HDRプラスミド（m）および TMEM132C HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTmem132cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTmem132c標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。