TLX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423424

概要

Tlx2 は、ホメオボックス型転写因子 TLX2（HOX11L1 とも呼ばれる）をコードしており、発生過程における神経系譜の規定や成熟に関与する核内調節因子として示唆されています。TLX2 は、末梢および中枢神経系における分化・移動・結線（接続性）を協調させる遺伝子発現プログラムに影響を与え、より広範なホメオボックスにより制御される発生ネットワークとも連携します。マウスモデルでは、TLX2 活性の変化が腸管神経系の形成異常や自律神経ニューロンの発生異常と関連づけられており、腸管運動や神経発達表現型を制御する経路との関与が示されています。これらの特性により、TLX2 は神経発生における転写制御と、その下流のエフェクター回路を研究するうえで有用な結節点となります。

TLX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTlx2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tlx2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tlx2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TLX2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TLX2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tlx2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TLX2の機能に不可欠なTlx2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tlx2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TLX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTLX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tlx2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TLX2 HDRプラスミド（m）および TLX2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTlx2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTlx2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。