TLR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423420

概要

Tlr6 はトール様受容体6（TLR6）をコードしており、TLR6 はパターン認識受容体として細胞表面で TLR2 と機能的なヘテロ二量体を形成し、微生物由来リポペプチドを検知して自然免疫シグナル伝達を開始します。リガンド結合後、TLR6 は MYD88 などのアダプタータンパク質を介して IRAK–TRAF6 シグナルを活性化し、NF-κB および MAPK 経路の活性化と、炎症性サイトカイン／ケモカインの誘導を促進します。マウスの骨髄系および上皮系のコンパートメントにおいて、TLR6 は抗微生物応答の形成に寄与するとともに、自然免疫と獲得免疫のクロストークの調節にも関与します。TLR6 依存性シグナルの制御破綻は、感染応答の変化、気道炎症、代謝性炎症モデルなどを含む炎症性病態の発症機序に関与することが示唆されています。

TLR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTlr6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tlr6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tlr6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TLR6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TLR6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tlr6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TLR6の機能に不可欠なTlr6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tlr6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TLR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTLR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tlr6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TLR6 HDRプラスミド（m）および TLR6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTlr6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTlr6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。