TLE1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423412

개요

Tle1은 전사 공동억제인자 TLE1(Transducin-Like Enhancer of split 1)을 암호화하며, DNA에 결합한 전사인자들과 상호작용하고 염색질 조절 복합체를 모집함으로써 유전자 발현을 조절하는 Groucho/TLE 계열 단백질입니다. 마우스 세포에서 TLE1은 Notch 및 Wnt/β-카테닌 반응성 전사 프로그램의 핵심 효과인자로 작용하며, 표적 프로모터와 인핸서를 억제함으로써 계통(라인리지) 지정, 신경 발달, 세포 정체성 유지에 기여합니다. 또한 발달 경로에서 들어오는 신호를 통합하여 세포 운명 결정, 분화 시기, 맥락 의존적 증식에 영향을 미칩니다. Wnt/Notch 경로의 균형과 후성유전적 억제가 교란되는 발달 조절 이상 및 종양성 신호전달 모델에서는 TLE1 관련 전사 조절의 변화가 연구되고 있습니다.

TLE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tle1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tle1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tle1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TLE1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TLE1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tle1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TLE1 기능에 중요한 Tle1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tle1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TLE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TLE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tle1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TLE1 HDR 플라스미드 (m) 및 TLE1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tle1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tle1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.