Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TIP120A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402506-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TIP120AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TIP120A (h) e o Plasmídeo Double Nickase TIP120A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CAND1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TIP120A Anticorpo (G-3): sc-137055
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TIP120A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402506-NIC | 20 µg | $410.00 |
CAND1 (TIP120A) codifica um regulador das ligases de ubiquitina do tipo cullin-RING que se liga a cullinas não neddiladas e promove a troca de módulos receptores de substrato, controlando assim a montagem e a remodelação dos CRLs. Por meio dessa atividade, TIP120A coordena a proteostase dependente de ubiquitina e influencia a progressão do ciclo celular, as respostas ao estresse de replicação do DNA e a degradação, dependente de sinalização, de proteínas regulatórias-chave. A desregulação da dinâmica dos CRLs e do equilíbrio entre neddilação/desneddilação tem sido associada à instabilidade genômica e a alterações no controle do crescimento, tornando CAND1 um nó relevante em vias frequentemente perturbadas na biologia do câncer. A função de TIP120A também é estudada no contexto do controle de qualidade dependente do proteassoma e da adaptação ao estresse, em que a seleção de substratos pelos CRLs molda fenótipos celulares.
TIP120A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CAND1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CAND1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CAND1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CAND1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.