TIMP-4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402560
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TIMP-4 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TIMP-4基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
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TIMP-4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402560 | 20 µg | $397.00 |
概述
TIMP4 编码组织金属蛋白酶抑制因子 4（tissue inhibitor of metalloproteinases-4，TIMP-4）。TIMP-4 是一种分泌型内源性抑制因子，能够结合并抑制基质金属蛋白酶（MMP），从而调控细胞外基质（ECM）的周转。通过调节细胞周围的蛋白水解过程，TIMP-4 影响细胞黏附、迁移以及组织重塑等程序，这些过程与 ECM–整合素信号、炎症刺激以及生长因子可用性相互关联。在纤维化、血管重塑以及肿瘤微环境动态等研究背景中，TIMP4 表达改变或 TIMP/MMP 平衡失调常被重点关注，因为 ECM 组成与蛋白酶活性会塑造细胞表型。TIMP-4 还参与调控依赖蛋白酶的生物活性分子加工处理，因此在基质生物学与蛋白质稳态相关的通路解析中也具有意义。
TIMP-4 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TIMP4基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TIMP4基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TIMP4开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TIMP-4蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TIMP4缺失的细胞模型，用于TIMP-4信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TIMP-4 功能至关重要的 TIMP4 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TIMP4 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TIMP-4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 TIMP-4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TIMP4 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TIMP-4 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 TIMP-4 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TIMP4同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TIMP4靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。