THOC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403390

概要

THOC1はTHO/TREX複合体の中核サブユニットをコードしており、転写とmRNAのプロセシングおよび核外輸送を、共転写的なメッセンジャーリボヌクレオタンパク質（mRNP）形成を協調させることで結び付けています。THOC1はRNAポリメラーゼIIや輸送因子との相互作用を介して、ゲノム全体にわたる転写産物の成熟を支え、Rループの恒常性を保護し、複製および転写の完全性の維持に寄与します。THOC1依存的なRNA輸送が破綻すると、細胞周期の進行やストレス応答が乱れ得ることから、この因子はゲノム安定性に影響する経路と関連付けられます。THOC1の発現変動やTREX複合体の機能不全は、複数のがん関連の状況やRNA代謝異常の研究において観察されており、THOC1は機構解明のための有用な結節点（ノード）となります。

THOC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTHOC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、THOC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、THOC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、THOC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、THOC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、THOC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• THOC1の機能に不可欠なTHOC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、THOC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• THOC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTHOC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、THOC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  THOC1 HDRプラスミド（h）および THOC1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTHOC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTHOC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。