THADA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405868

Visão geral

THADA (associado ao adenoma da tireoide) codifica uma grande proteína citoplasmática implicada na homeostase energética celular e em processos de adaptação ao estresse, com ligações descritas à função do retículo endoplasmático e ao manejo de cálcio. Estudos genéticos associam o THADA à suscetibilidade a neoplasias da tireoide e a características relacionadas ao sistema endócrino, e alterações na atividade de THADA têm sido conectadas a fenótipos metabólicos em diferentes populações. Em modelos celulares, a perturbação de THADA é usada para investigar vias que acoplam o sensoriamento de nutrientes, a fisiologia de organelas e o controle do crescimento celular. Essas características tornam o THADA um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização associada ao metabolismo e de biologia tumoral dependente do contexto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO THADA (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene THADA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do THADA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do THADA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína THADA.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de THADA para a investigação da sinalização de THADA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) THADA críticos para a função THADA
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos THADA para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo THADA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo THADA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus THADA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo THADA Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR THADA (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia THADA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo THADA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.