TGF beta Receptor 2/TGFBR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400144-NIC

TGFBR2 codifica o receptor 2 do fator de crescimento transformador beta (TGF-βR2), uma quinase transmembranar de serina/treonina que se liga a ligantes de TGF-β e inicia a sinalização canônica de SMAD2/3 por meio da fosforilação de TGFBR1, além de promover crosstalk com as vias MAPK, PI3K/AKT e da família Rho. Por meio dessas redes, o TGF-βR2 regula a transição epitélio–mesênquima, o controle do ciclo celular, a modulação imune e a homeostase da matriz extracelular, moldando o desenvolvimento tecidual e o reparo de feridas. Alterações na função ou na expressão de TGFBR2 perturbam a fidelidade da via e estão associadas a programas de fibrose desregulados e a processos oncogênicos, incluindo mudanças na inibição do crescimento, na invasão e na sinalização do microambiente tumoral. Como a sinalização de TGF-β é altamente dependente do contexto, TGFBR2 é frequentemente estudado para dissecar respostas transcricionais específicas de tipo celular e o controle por feedback em circuitos de citocinas e de resposta ao estresse.

TGF beta Receptor 2/TGFBR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TGFBR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TGFBR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TGFBR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TGFBR2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.