TGFβ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400496-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TGFβ2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TGFβ2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TGFβ2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TGFB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TGFβ2 Anticorpo (H-6): sc-374659
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TGFβ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400496-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TGFβ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400496-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TGFB2 codifica o fator de crescimento transformador beta 2 (TGFβ2), uma citocina secretada que sinaliza por meio de receptores do tipo I/II com atividade quinase serina/treonina para ativar a transcrição dependente de SMAD2/3 e vias não canônicas, como MAPK, PI3K/AKT e GTPases da família Rho. O TGFβ2 regula a proliferação celular, a diferenciação, a apoptose, a modulação imune e a remodelação da matriz extracelular, contribuindo para o desenvolvimento tecidual e a homeostase. A desregulação da sinalização TGFB2/TGFβ2 está associada a alterações nas transições epitélio–mesênquima, à remodelação relacionada à fibrose, a programas angiogênicos e a fenótipos de evasão imune observados em diversos contextos de doença. Em biologia do câncer e em estudos de regeneração, o TGFB2 é frequentemente investigado por seus papéis na comunicação entre estroma e tumor, na deposição de matriz e na especificação de linhagens celulares.
TGFβ2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TGFB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TGFB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TGFB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TGFB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.