TGFβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423367
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TGFβ2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TGFβ2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TGFβ2 Anticorpo (H-6): sc-374659
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TGFβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423367 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tgfb2 codifica o fator de crescimento transformador beta 2 (TGFβ2), uma citocina secretada que sinaliza por meio dos receptores de TGFβ para ativar programas transcricionais dependentes de SMAD2/3 e interagir com vias não canônicas, incluindo MAPK, PI3K/AKT e GTPases Rho. Em tecidos de camundongo, o TGFβ2 contribui para a regulação da deposição de matriz extracelular, da proliferação e diferenciação celular, da transição epitélio-mesenquimal e da modulação imune no microambiente tecidual. A sinalização desregulada de TGFβ2 está associada a fibrose aberrante, angiogênese alterada e mudanças no tônus inflamatório, com relevância para anomalias do desenvolvimento e biologia tumoral. Como os efeitos da via dependem fortemente do contexto, Tgfb2 é frequentemente estudado para esclarecer como sinais locais de TGFβ moldam o destino celular e o remodelamento do estroma.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TGFβ2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tgfb2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tgfb2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tgfb2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TGFβ2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tgfb2 para a investigação da sinalização de TGFβ2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tgfb2 críticos para a função TGFβ2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tgfb2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TGFβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TGFβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tgfb2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TGFβ2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TGFβ2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tgfb2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tgfb2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.