TFPI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417987
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TFPI-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TFPI-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TFPI-2 Anticorpo (B-7): sc-48380
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TFPI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417987 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TFPI2 codifica o inibidor 2 da via do fator tecidual (TFPI-2), um inibidor secretado de serina proteases do tipo Kunitz que modula a proteólise pericelular na matriz extracelular. Ao inibir proteases envolvidas na remodelação da matriz e na atividade de proteases associadas à coagulação, o TFPI-2 influencia a adesão, migração e invasão celulares, bem como a homeostase tecidual. A atividade do TFPI-2 cruza-se com redes de proteases extracelulares ligadas à regulação de metaloproteinases da matriz e à sinalização relacionada à trombina, moldando o equilíbrio entre ativação e inibição proteolítica no microambiente tumoral e em contextos vasculares. A expressão desregulada de TFPI2 tem sido associada a uma renovação anómala da matriz extracelular e a fenótipos invasivos alterados em múltiplos modelos relevantes para doenças, sustentando a sua utilização como um nó mecanístico em estudos de processos relacionados com metástases.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TFPI-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TFPI2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TFPI2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TFPI2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TFPI-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TFPI2 para a investigação da sinalização de TFPI-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TFPI2 críticos para a função TFPI-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TFPI2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TFPI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TFPI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TFPI2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TFPI-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TFPI-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TFPI2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TFPI2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.