TFIIH p62 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402239-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TFIIH p62O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TFIIH p62 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TFIIH p62 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GTF2H1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TFIIH p62 Anticorpo (H-10): sc-25329
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TFIIH p62 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402239-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TFIIH p62 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402239-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GTF2H1 codifica a proteína p62 do TFIIH, uma subunidade essencial do complexo TFIIH que acopla a iniciação da transcrição pela RNA polimerase II ao reparo por excisão de nucleotídeos. Por meio de interações com outros componentes do TFIIH, a p62 contribui para a abertura do promotor e auxilia na verificação de danos no DNA e no reparo durante o NER do genoma global e o NER acoplado à transcrição. Essas funções se integram ao controle transcricional central, à sinalização da resposta a danos no DNA e à manutenção da estabilidade do genoma. A disfunção da atividade do TFIIH está implicada em doenças caracterizadas por reparo de DNA defeituoso e desregulação transcricional, incluindo síndromes do espectro xeroderma pigmentosum–Cockayne e a tricotiodistrofia.
TFIIH p62 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GTF2H1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GTF2H1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GTF2H1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GTF2H1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.