TEM1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-427713

개요

Cd248는 종양 내피 표지자 1(TEM1)을 암호화하며, TEM1은 활성화된 혈관주위세포(pericyte), 기질 섬유아세포, 그리고 혈관 연관 간엽성 세포에 풍부한 I형 막관통 당단백질이다. 생쥐 조직에서 TEM1은 세포–기질 상호작용과 혈관주위 리모델링에 기여하며, 세포외기질(ECM) 조직화, 부착(adhesion) 역학, 그리고 혈관신생 및 섬유화 미세환경을 지지하는 이동 프로그램과 연관된 신호를 통합한다. Cd248 발현은 염증성 및 종양성 환경에서의 기질 활성화와 흔히 연관되며, 이때 변화된 혈관주위세포–내피세포 간 상호작용(crosstalk)은 혈관 안정화와 조직 리모델링에 영향을 줄 수 있다. 따라서 Cd248는 종양 기질 생물학, 상처 치유, 그리고 섬유화 관련 경로 모델에서 널리 연구된다.

TEM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cd248 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cd248 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cd248의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TEM1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TEM1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cd248 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TEM1 기능에 중요한 Cd248 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cd248 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TEM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TEM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cd248 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TEM1 HDR 플라스미드 (m) 및 TEM1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cd248 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cd248 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.