TBX19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406919

Visão geral

TBX19 (fator de transcrição T-box 19, também conhecido como TPIT) é um fator de transcrição restrito à linhagem, necessário para a especificação e a manutenção da identidade dos corticotrofos hipofisários. Ele regula programas de expressão gênica que controlam a transcrição da proopiomelanocortina (POMC) e a sinalização a jusante do eixo hipotálamo–hipófise–adrenal, integrando-se a vias de desenvolvimento mais amplas dependentes de T-box. Ao moldar a diferenciação endócrina e a função de células produtoras de hormônios, o TBX19 é amplamente utilizado como marcador e como nó mecanístico em estudos de organogênese da hipófise e de controle transcricional. Alterações na atividade de TBX19 têm sido associadas a disfunção de corticotrofos e a fenótipos endócrinos congênitos, reforçando sua relevância para pesquisas de modelagem de doenças relacionadas à insuficiência hipofisária.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TBX19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TBX19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TBX19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TBX19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TBX19.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TBX19 para a investigação da sinalização de TBX19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TBX19 críticos para a função TBX19
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TBX19 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TBX19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TBX19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TBX19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TBX19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TBX19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TBX19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TBX19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.