TANC CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406741

概要

TANC1 は TANC をコードする遺伝子であり、TANC は多ドメイン型の足場タンパク質として興奮性シナプスに豊富に存在し、シナプス後肥厚（PSD）の組織化やシグナル伝達複合体の組み立てを支えます。TANC はシナプス受容体や細胞骨格調節因子との相互作用を介して、樹状突起スパインの形成、シナプスの安定化、ならびに活動依存的な再構築に寄与します。これらの機能により、TANC1 は回路形成や恒常性シグナルに影響する神経発達およびシナプス可塑性の経路に位置づけられます。シナプス足場構造や結合性の制御異常は、神経発達疾患および神経精神疾患の病態機構と関連づけられていることから、TANC1 は神経モデルにおける遺伝子型—表現型関係を研究するうえで有用な座位となります。

TANC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTANC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TANC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TANC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TANCタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TANCシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TANC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TANCの機能に不可欠なTANC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TANC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TANC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTANC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TANC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TANC HDRプラスミド（h）および TANC HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTANC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTANC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。