Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TAF II p250 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435426
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TAF II p250 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TAF II p250, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TAF II p250 Anticorpo (A-10): sc-393981
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TAF II p250 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-435426 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Taf1 codifica a TAF II p250 (TAF1), uma subunidade central do complexo TFIID que nuclea a montagem do complexo de pré-iniciação da RNA polimerase II e integra o reconhecimento do promotor com a saída transcricional. Como regulador multifuncional com atividades de quinase e acetiltransferase, a TAF1 influencia a organização da cromatina, o início da transcrição e programas de expressão gênica ligados ao ciclo celular. Em sistemas murinos, o controle transcricional dependente de Taf1 é central para o desenvolvimento embrionário, a regulação de genes neuronais e vias de proteostase que moldam as respostas celulares ao estresse. A desregulação de TAF1 e da transcrição mediada por TFIID tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a perturbações mais amplas da homeostase da expressão gênica relevantes para a modelagem de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TAF II p250 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Taf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Taf1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Taf1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TAF II p250.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Taf1 para a investigação da sinalização de TAF II p250, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Taf1 críticos para a função TAF II p250
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Taf1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TAF II p250 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TAF II p250 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Taf1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TAF II p250 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TAF II p250 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Taf1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Taf1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.