TAF II p135 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404230

Visão geral

TAF4 codifica a TAF II p135, uma subunidade central do complexo TFIID que coopera com a TBP e outras TAFs para iniciar a transcrição dependente da RNA polimerase II. Por meio de interações com fatores de transcrição específicos de sequência e reguladores associados à cromatina, a TAF II p135 contribui para o reconhecimento de promotores, a montagem do complexo de pré-iniciação e o controle de programas de expressão gênica dependentes do estado celular. A função de TAF4 está intimamente ligada ao remodelamento de cromatina e a redes de coativadores transcricionais, conectando-a à regulação de proliferação, diferenciação e transcrição responsiva ao estresse. A atividade desregulada de TFIID/TAF e a iniciação transcricional alterada são frequentemente estudadas no contexto de reprogramação transcricional oncogênica e de outros distúrbios da regulação gênica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TAF II p135 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TAF4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TAF4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TAF4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TAF II p135.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TAF4 para a investigação da sinalização de TAF II p135, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TAF4 críticos para a função TAF II p135
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TAF4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TAF II p135 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TAF II p135 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TAF4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TAF II p135 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TAF II p135 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TAF4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TAF4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.