Plasmide Double Nickase (h) TADA3L: sc-409222-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TADA3L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TADA3L Double Nickase (h) et le plasmide TADA3L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TADA3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TADA3L Antibody (D-10): sc-166118
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TADA3L | sc-409222-NIC | 20 µg | $410.00 |
TADA3 code pour TADA3L, un adaptateur transcriptionnel qui agit au sein de complexes d’acétyltransférases des histones tels que SAGA/GCN5 afin de coordonner le remodelage de la chromatine et la transcription dépendante de l’ARN polymérase II. En reliant des facteurs de transcription spécifiques de séquence à l’acétylation de substrats histoniques, TADA3L contribue à réguler des programmes d’expression génique contrôlant la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN et la différenciation. La perturbation de cet axe peut modifier les états épigénétiques et la fidélité transcriptionnelle, des processus fréquemment impliqués dans la biologie tumorale et d’autres troubles liés à une dérégulation de la chromatine et de la transcription. Par conséquent, TADA3L est couramment étudié dans des voies reliant la coactivation transcriptionnelle au maintien du génome et à la signalisation du stress cellulaire.
TADA3L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TADA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TADA3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TADA3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TADA3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.