T-type Ca++ CP α1G Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418331-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T-type Ca++ CP α1GO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase T-type Ca++ CP α1G (h) e o Plasmídeo Double Nickase T-type Ca++ CP α1G (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CACNA1G. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T-type Ca++ CP α1G Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418331-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T-type Ca++ CP α1G Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418331-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1G codifica a subunidade formadora do poro CaV3.1 (α1G) de canais de cálcio do tipo T dependentes de voltagem, que se ativam a baixos potenciais de membrana para gerar um influxo transitório de Ca2+. Essa corrente sustenta o disparo rítmico, a atividade de rajada por rebote e a sinalização dependente de cálcio que acopla a excitabilidade da membrana a programas de expressão gênica em células excitáveis e em algumas não excitáveis. A atividade de CaV3.1 se cruza com vias que regulam a homeostase intracelular de Ca2+, as oscilações neuronais e o acoplamento excitação–secreção, influenciando processos como progressão do ciclo celular e diferenciação por meio de efetores sensíveis ao cálcio. A expressão desregulada de CACNA1G ou a função alterada do canal têm sido associadas a mudanças na excitabilidade elétrica e na sinalização de cálcio em fenótipos neurológicos e cardiovasculares, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de biologia de canais iônicos.
T-type Ca++ CP α1G O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CACNA1G em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CACNA1G. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CACNA1G. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CACNA1G interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.