Synoviolin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403476-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SynoviolinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Synoviolin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Synoviolin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SYVN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Synoviolin Anticorpo (4H4): sc-293484
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Synoviolin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403476-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Synoviolin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403476-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYVN1 codifica a sinoviolina, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING residente no retículo endoplasmático (RE), que atua na degradação associada ao RE (ERAD) ao ubiquitinar proteínas mal dobradas ou em excesso para posterior degradação pelo proteassoma. Por meio da modulação do controle de qualidade proteico dependente de ubiquitina, a sinoviolina influencia a proteostase do RE, as respostas ao estresse celular e redes de sinalização inflamatória. Alterações na atividade de SYVN1 têm sido associadas a uma regulação inadequada do estresse do RE e a uma homeostase proteica aberrante em contextos como hiperplasia sinovial e outras patologias associadas à inflamação. Como regulador da ubiquitinação e da ERAD, o SYVN1 é amplamente estudado em mecanismos que conectam proteostase à sobrevivência celular, à sinalização imune e à remodelação tecidual.
Synoviolin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SYVN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SYVN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SYVN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SYVN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.