Syne-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402804
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Syne-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Syne-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Syne-1 Anticorpo (3G2): sc-293465
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Syne-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402804 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SYNE1 codifica a Syne-1 (nesprina-1), uma grande proteína de suporte do complexo LINC, rica em repetições de espectrina, que acopla o núcleo ao citoesqueleto por meio de interações com proteínas SUN, actina e filamentos intermédios. Ao regular o posicionamento nuclear, a mecanotransdução e a organização do citoesqueleto, a Syne-1 influencia processos como migração celular, polaridade e arquitetura dos tecidos. Alterações em SYNE1 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, incluindo ataxia cerebelar autossómica recessiva, e também foram reportadas em estudos de genómica do cancro, nos quais o acoplamento núcleo–citoesqueleto alterado pode afetar a estabilidade do genoma e o comportamento celular. Estas características tornam o SYNE1 um alvo relevante para investigar a biologia do invólucro nuclear, a transmissão de forças e fenótipos celulares associados a doenças em sistemas modelo humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Syne-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SYNE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SYNE1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SYNE1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Syne-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SYNE1 para a investigação da sinalização de Syne-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SYNE1 críticos para a função Syne-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SYNE1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Syne-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Syne-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SYNE1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Syne-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Syne-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SYNE1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SYNE1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.