Superoxide Dismutase 1/SOD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423069-NIC

O gene **Sod1** de camundongo codifica a superóxido dismutase 1 (SOD1), uma enzima antioxidante citosólica dependente de Cu/Zn que catalisa a dismutação de radicais superóxido em peróxido de hidrogênio e oxigênio, limitando assim os danos oxidativos a proteínas, lipídios e ácidos nucleicos. A atividade da SOD1 está integrada às vias de homeostase redox celular, incluindo os sistemas de glutationa e de catalase/peroxirredoxinas, e influencia a função mitocondrial, a proteostase e a sinalização inflamatória sob estresse oxidativo. A desregulação da função da SOD1 ou sua agregação tem sido amplamente estudada no contexto de neurodegeneração e da vulnerabilidade de neurônios motores, e alterações na expressão de **Sod1** também são usadas para modelar lesão oxidativa no envelhecimento, no estresse metabólico e na exposição a toxicantes. Como resultado, **Sod1** é um alvo comum em estudos mecanísticos sobre o manejo de espécies reativas de oxigênio (ROS), sinalização de resposta ao estresse e vias downstream associadas a dano.

Superoxide Dismutase 1/SOD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sod1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sod1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sod1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sod1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.