Strumpellin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402808
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Strumpellin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Strumpellin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Strumpellin Anticorpo (B-10): sc-377146
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Strumpellin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402808 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O WASHC5 codifica a strumpellina, um componente central essencial do complexo WASH, que regula a polimerização de actina dependente de Arp2/3 em membranas endossomais. Ao coordenar a tubulação e a fissão de endossomos, a strumpellina sustenta a triagem e a reciclagem de cargas associadas ao retrómero, influenciando o tráfego de recetores de membrana e de transportadores de nutrientes. A atividade do WASHC5 integra a remodelação do citoesqueleto com as vias endossomo–membrana plasmática e endossomo–Golgi, moldando a migração celular, a saída de sinalização e a homeostase lisossomal. Variações patogénicas em WASHC5 têm sido associadas a fenótipos neurodegenerativos, incluindo paraplegia espástica hereditária, destacando a sua relevância para estudos de manutenção neuronal e de stress do tráfego de membranas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Strumpellin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WASHC5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WASHC5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WASHC5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Strumpellin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WASHC5 para a investigação da sinalização de Strumpellin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WASHC5 críticos para a função Strumpellin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WASHC5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Strumpellin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Strumpellin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WASHC5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Strumpellin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Strumpellin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WASHC5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WASHC5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.