STK33 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404127-LAC

STK33は、細胞周期の進行、細胞骨格ダイナミクス、ならびに細胞ストレス応答を協調的に制御する細胞内シグナル伝達ネットワークの調節に関与するとされるセリン／スレオニンプロテインキナーゼをコードします。キナーゼとしてのSTK33は、転写プログラムやタンパク質安定性に影響を及ぼすリン酸化依存的経路を調節し、上流の刺激を増殖・生存に関わる下流の変化へと結び付けます。STK33の発現や活性の変化は、複数の腫瘍モデルにおいて、がん遺伝子シグナルへの依存性や異常な増殖制御という観点から検討されてきました。これらの特徴により、STK33は、キナーゼ制御型シグナル伝達の作用機序、経路間クロストーク、ならびにヒト細胞における遺伝子型依存的な脆弱性を解析するための有用な標的となります。

STK33 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なSTK33の発現上昇を可能にします。

STK33 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、STK33転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性STK33の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のSTK33ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。