Plasmide Double Nickase (h) STC2: sc-405292-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) STC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide STC2 Double Nickase (h) et le plasmide STC2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant STC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: STC2 Antibody (2B11): sc-293388
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) STC2 | sc-405292-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) STC2 | sc-405292-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La stanniocalcine 2 (STC2) est une hormone glycoprotéique sécrétée, impliquée dans l’homéostasie du calcium et du phosphate ainsi que dans des programmes plus larges d’adaptation au stress dans les cellules humaines. Elle est régulée par l’hypoxie et par la signalisation du stress du réticulum endoplasmique, et s’articule avec des voies qui contrôlent le stress oxydant, le métabolisme mitochondrial et la survie cellulaire, notamment les réseaux HIF-1 et de la réponse aux protéines mal conformées (unfolded protein response, UPR). L’expression de STC2 a été associée à des phénotypes de prolifération et d’invasion modifiés et est fréquemment étudiée en biologie tumorale, où elle corrèle avec les réponses au stress du microenvironnement. Au-delà de l’oncologie, STC2 est également étudiée en recherche métabolique et cardiovasculaire pour ses rôles dans la protection cellulaire, le remodelage tissulaire et la signalisation liée à l’inflammation.
STC2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus STC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de STC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de STC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de STC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.