SSTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403410

概要

SSTR1はソマトスタチン受容体1をコードしており、Gi/oに共役するGPCRとしてソマトスタチンに結合し、アデニリルシクラーゼ活性を抑制して細胞内cAMPを低下させ、イオンチャネルのコンダクタンスを調節します。GPCRシグナル伝達を介して、SSTR1はMAPKやPI3K関連のカスケードに影響を与え、状況依存的に神経の興奮性、内分泌分泌、細胞周期制御の調節に寄与します。受容体活性は神経内分泌コミュニケーションやホルモン放出経路を形作り、ソマトスタチンシグナルの変化は、分泌・増殖・神経伝達の調節異常を伴う疾患において研究されてきました。そのためSSTR1は、ヒト細胞モデルにおける抑制性GPCRネットワークや経路間クロストークを解析するうえで有用な標的です。

SSTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSSTR1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SSTR1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SSTR1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SSTR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SSTR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SSTR1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SSTR1の機能に不可欠なSSTR1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SSTR1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SSTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSSTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SSTR1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SSTR1 HDRプラスミド（h）および SSTR1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSSTR1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSSTR1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。