SSH1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-433087-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SSH1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SSH1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase SSH1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ssh1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SSH1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-433087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SSH1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-433087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A SSH1 (Slingshot-1) de camundongo é uma fosfatase de dupla especificidade que regula a remodelação do citoesqueleto de actina ao desfosforilar e reativar a cofilina, promovendo a renovação da F-actina e a motilidade celular direcional. Por meio da integração com a sinalização de GTPases da família Rho, com as vias LIMK/cofilina e com redes de fosfatases responsivas ao estresse, a SSH1 ajuda a coordenar a dinâmica de lamelipódios, o crescimento de neuritos e a migração dependente de adesão. Alterações na atividade da SSH1 têm sido associadas à desregulação da organização do citoesqueleto e a fenótipos de movimentação celular prejudicada, relevantes para estudos de neurodesenvolvimento, inflamação e modelos de invasão de células tumorais. Em sistemas murinos, a SSH1 é, portanto, frequentemente investigada por seu papel em mecanotransdução, plasticidade sináptica e remodelamento tecidual dependente de migração.
SSH1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ssh1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ssh1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ssh1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ssh1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.