SREBP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400094-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SREBP-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SREBP-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SREBP-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SREBF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SREBP-1 Anticorpo (A-4): sc-365513
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SREBP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400094-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SREBP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400094-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O SREBF1 humano codifica a proteína 1 de ligação a elementos regulatórios de esteróis (SREBP-1), um fator de transcrição ancorado à membrana que é ativado por proteólise em resposta ao estado lipídico e, em seguida, se transloca para o núcleo para induzir a expressão de genes lipogênicos. A SREBP-1 coordena os programas de biossíntese de ácidos graxos e triglicerídeos ao regular enzimas como ACLY, ACACA, FASN e SCD, integrando sinais da insulina, do mTORC1 e de vias de detecção de nutrientes. Por meio do seu controle da homeostase lipídica, a SREBP-1 influencia a biogênese de membranas, as respostas ao estresse do RE e a reprogramação metabólica durante proliferação e diferenciação. A atividade desregulada de SREBF1/SREBP-1 tem sido associada a disfunção metabólica e a fenótipos de acúmulo de lipídios, e é frequentemente estudada em contextos de lipogênese alterada em modelos de câncer e doenças hepáticas.
SREBP-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SREBF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SREBF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SREBF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SREBF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.