SR-A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-422832-KO-2

概要

Msr1は、スカベンジャー受容体クラスA（SR-A）をコードしています。SR-Aはマクロファージに豊富に発現するパターン認識受容体で、修飾リポタンパク質、アポトーシス細胞、微生物由来リガンドに結合し、取り込みと自然免疫シグナル伝達を協調的に制御します。SR-Aは受容体介在性エンドサイトーシスおよび貪食を促進し、Toll様受容体（TLR）経路やサイトカインネットワークとのクロストークを通じて、脂質処理、炎症応答、ならびに組織障害の収束（修復・沈静化）に影響を与えます。マウスモデルでは、Msr1/SR-A活性の変化が、泡沫細胞形成の異常、無菌性炎症、感染感受性と関連することが示されており、動脈硬化様プロセス、神経炎症、代謝性疾患の機序研究において重要です。また、骨髄系細胞系列での発現は、複雑な組織微小環境におけるマクロファージの分極、抗原プロセシング、クリアランス経路の研究にも有用です。

SR-A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるMsr1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Msr1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Msr1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SR-Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SR-Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Msr1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SR-Aの機能に不可欠なMsr1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Msr1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SR-A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSR-A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Msr1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SR-A HDRプラスミド（m）および SR-A HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMsr1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMsr1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。