Squalene epoxidase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402870-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Squalene epoxidaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Squalene epoxidase (h) e o Plasmídeo Double Nickase Squalene epoxidase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SQLE. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Squalene epoxidase Anticorpo (H-6): sc-271651
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Squalene epoxidase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Squalene epoxidase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SQLE codifica a epoxidase de esqualeno, uma monooxigenase dependente de flavina que catalisa a epoxidação do esqualeno a 2,3-oxidoesqualeno, uma etapa inicial que influencia a taxa na biossíntese de colesterol e esteróis. Como enzima associada ao retículo endoplasmático, ajuda a regular a homeostase de esteróis e integra-se ao fluxo da via do mevalonato, à dinâmica de gotículas lipídicas e ao controle por retroalimentação da composição de membranas. A perturbação da atividade de SQLE pode remodelar os perfis lipídicos celulares, impactando plataformas de sinalização e a adaptação metabólica sob estresse. A regulação alterada da biossíntese de esteróis envolvendo SQLE tem sido associada a fenótipos relacionados à dislipidemia e à reprogramação metabólica observada em múltiplos contextos de doença, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de metabolismo lipídico.
Squalene epoxidase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SQLE em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SQLE. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SQLE. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SQLE interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.