SPNS2慢病毒激活颗粒(m): sc-432145-LAC
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- SPNS2 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- SPNS2慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 SPNS2 慢病毒激活质粒 (m) 和 SPNS2 慢病毒激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 靶向 Spns2 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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SPNS2慢病毒激活颗粒(m) | sc-432145-LAC | 200 µl | $455.00 |
Spns2 编码 SPNS2，这是一种多跨膜转运蛋白，负责将鞘氨醇-1-磷酸（S1P）外排。S1P 是一种脂质介质，可在细胞外形成 S1P 梯度，从而调控免疫细胞迁移、血管成熟以及内皮屏障功能。通过调节可用于 S1PR1–S1PR5 信号传导的 S1P 含量，SPNS2 影响包括 PI3K–AKT、MAPK/ERK、Rho GTP 酶介导的细胞骨架重塑以及 GPCR 驱动的趋化等下游通路。在小鼠体系中，Spns2 活性改变与淋巴细胞外流、炎症反应和血管表型变化相关，因此与免疫稳态和组织微环境信号研究密切相关。因而，该基因被广泛用于脂质信号传导、内皮–免疫互作以及应激响应性迁移程序的机制研究。
SPNS2 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Spns2 表达。
SPNS2 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Spns2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性SPNS2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Spns2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。