Sp110 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405542-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sp110O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sp110 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sp110 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SP110. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sp110 Anticorpo (B-10): sc-376741
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sp110 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405542-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sp110 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405542-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SP110 codifica a Sp110, uma proteína associada a corpos nucleares, implicada no controlo transcricional dependente da cromatina e na regulação da imunidade inata. A Sp110 está ligada a programas génicos responsivos ao interferão e a estados de ativação de macrófagos, e pensa-se que module a arquitetura nuclear e a disponibilidade de fatores de transcrição nos corpos nucleares PML (leucemia promielocítica). Estudos genéticos e funcionais associam o SP110 à suscetibilidade a infeção por micobactérias e a fenótipos imunitários inflamatórios, salientando a sua relevância nas interações hospedeiro–patógeno. Como regulador de redes transcricionais imunitárias, o SP110 é frequentemente estudado em vias que governam a sinalização por citocinas, a apresentação de antigénios e respostas antimicrobianas intrínsecas à célula.
Sp110 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SP110 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SP110. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SP110. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SP110 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.