Sp110 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405542
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sp110 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sp110, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sp110 Anticorpo (B-10): sc-376741
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sp110 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405542 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SP110 codifica a Sp110, uma proteína associada aos corpos nucleares, implicada na regulação da transcrição e no controle, dependente da cromatina, de programas imunes. A Sp110 participa da arquitetura nuclear e interage com complexos regulatórios que moldam a expressão gênica responsiva a interferon e a expressão de genes inflamatórios, vinculando-a a vias de defesa do hospedeiro e a funções associadas a macrófagos. Estudos genéticos e de expressão conectaram o SP110 à suscetibilidade e à variação em fenótipos mediados pelo sistema imune, sustentando seu uso como um ponto de entrada molecular para dissecar redes de sinalização da imunidade inata. Alterações na atividade de SP110 também são exploradas para estudar como componentes dos corpos nucleares influenciam o estado celular, os perfis de expressão transcricional e circuitos gênicos de resposta a patógenos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sp110 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SP110 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SP110, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SP110 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sp110.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SP110 para a investigação da sinalização de Sp110, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SP110 críticos para a função Sp110
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SP110 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sp110 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Sp110 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SP110. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sp110 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Sp110 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SP110 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SP110 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.