SP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404996-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SP (h) e o Plasmídeo Double Nickase SP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TFF2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SP Anticorpo (4G7C3): sc-517213
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404996-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404996-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O fator trevo 2 (TFF2) codifica um peptídeo secretado associado a mucinas que contribui para a proteção do epitélio gástrico e intestinal ao promover a restituição, modular as propriedades da barreira de muco e sustentar a migração associada a feridas. O TFF2 é induzido durante lesões da mucosa e interage com redes de sinalização epiteliais e estromais que moldam respostas inflamatórias e o remodelamento tecidual, incluindo vias ligadas à sinalização por citocinas e à dinâmica da matriz extracelular. A expressão desregulada de TFF2 tem sido associada à gastrite crônica, a condições inflamatórias intestinais e à tumorigênese gastrointestinal, nas quais a alteração da função de barreira e de programas de cicatrização pode influenciar a progressão da doença. Como marcador e mediador do reparo da mucosa, o TFF2 é amplamente estudado em modelos de homeostase epitelial, metaplasia e inflamação impulsionada pelo microambiente.
SP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TFF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TFF2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TFF2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TFF2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.