Sox-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403896

概要

SOX3は、DNAに結合するHMGボックス型転写因子であるSox-3をコードしており、初期の神経外胚葉の運命決定および神経前駆細胞としての同一性の維持に不可欠な、クロマチン依存的な遺伝子発現プログラムを形成します。Sox-3は他のSOXファミリー因子とともに中核的な発生制御ネットワークの一部として機能し、発生中の中枢神経系および視床下部—下垂体軸における細胞運命決定、増殖、分化を制御する経路に影響を与えます。SOX3の量的変化（ドシージ）や制御の破綻は、神経発達表現型や視床下部—下垂体発生の異常と関連することが示されており、ヒト発生における転写制御の研究における重要性が示唆されています。研究現場では、SOX3は系譜コミットメント、神経分化モデル、ならびに転写因子ネットワークの結線（ワイヤリング）における役割の解明を目的として、しばしば解析対象となります。

Sox-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSOX3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SOX3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SOX3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Sox-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Sox-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SOX3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Sox-3の機能に不可欠なSOX3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SOX3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sox-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSox-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SOX3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sox-3 HDRプラスミド（h）および Sox-3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSOX3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSOX3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。