SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404660
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SNX5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SNX5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SNX5 Anticorpo (F-11): sc-515215
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404660 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O SNX5 humano (sorting nexin 5) codifica uma proteína endossomal contendo um domínio PX, que se liga a fosfoinositídeos e coopera com fatores de remodelamento de membrana para regular a triagem de cargas e o tráfego vesicular. O SNX5 participa das rotas de endossomo para Golgi e de reciclagem endossomal, sustentando a renovação de receptores e a atenuação de sinais ao controlar a localização subcelular de proteínas transmembranares. Por meio de suas funções na tubulação endossomal e na montagem de complexos proteicos, o SNX5 influencia processos de homeostase celular ligados à sinalização mediada por receptores, à captação de nutrientes e à composição de membranas. Vias de tráfego endossomal alteradas envolvendo sorting nexins estão associadas à desregulação da sinalização por fatores de crescimento e a respostas celulares ao estresse, tornando o SNX5 relevante para estudos mecanísticos de defeitos de tráfego associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SNX5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SNX5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SNX5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SNX5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SNX5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SNX5 para a investigação da sinalização de SNX5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SNX5 críticos para a função SNX5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SNX5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SNX5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SNX5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SNX5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SNX5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SNX5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.