SNX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404028

Visão geral

O SNX3 humano codifica a sorting nexin 3, uma proteína endossomal contendo domínio PX que se liga ao fosfatidilinositol 3-fosfato e ajuda a organizar o tráfego de membranas em endossomos precoces. O SNX3 atua como um acessório-chave da via do retromer, apoiando a reciclagem de cargas transmembranares específicas do endossomo para o Golgi e do endossomo para a membrana plasmática, e contribuindo para a triagem de receptores, a homeostase de transportadores de nutrientes e a atenuação de sinais. Por meio de seu papel na triagem endossomal e na recuperação de cargas, o SNX3 influencia processos ligados à sinalização Wnt, à renovação (turnover) de receptores de membrana e à polaridade celular. A desregulação do tráfego endossomal e a triagem incorreta de cargas associada ao retromer estão implicadas em fenótipos relacionados à neurodegeneração e ao câncer, tornando o SNX3 um nó útil para estudos mecanísticos da biologia de doenças dependente de tráfego intracelular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SNX3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SNX3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SNX3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SNX3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SNX3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SNX3 para a investigação da sinalização de SNX3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SNX3 críticos para a função SNX3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SNX3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SNX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SNX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SNX3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SNX3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SNX3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SNX3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SNX3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.