SNAI 1 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-400244-ACT

SNAI1は、亜鉛フィンガー型の転写抑制因子であるSNAI1（Snail）をコードしており、CDH1を含む上皮系遺伝子プログラムを直接抑制し、間葉系形質を促進することで、上皮間葉転換（EMT）を統括します。SNAI1は、TGF-β、Wnt/β-カテニン、Notch、炎症性シグナル伝達ネットワークとの相互作用を介して、発生や組織リモデリングの過程における細胞接着、極性、運動性、系譜可塑性を制御します。SNAI1活性の異常は、浸潤、転移性播種、幹細胞様状態、治療抵抗性といった腫瘍進行の表現型としばしば関連し、さらに線維化に伴う転写プログラムにも寄与します。これらの特徴により、SNAI1はEMTの転写制御、クロマチンリモデリング、微小環境に駆動される細胞状態遷移を研究するうえでの中心的なハブとなっています。

SNAI 1 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性SNAI1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

SNAI 1 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における SNAI1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はSNAI1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性SNAI 1の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のSNAI1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるSNAI 1依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびSNAI1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるSNAI 1経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。