Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SMP30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401934
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SMP30 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SMP30, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SMP30 Anticorpo (E-11): sc-390098
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SMP30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401934 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O RGN humano codifica a proteína marcadora de senescência 30 (SMP30/Regucalcina), uma proteína ligante de cálcio implicada na homeostase do cálcio celular, no equilíbrio redox e na regulação metabólica. A SMP30 tem sido associada à modulação da sinalização intracelular dependente de Ca2+, à função mitocondrial e às respostas ao estresse oxidativo — processos que influenciam a sobrevivência celular e fenótipos associados ao envelhecimento. Alterações na expressão de RGN/SMP30 foram relatadas em contextos que envolvem metabolismo hepático, estresse inflamatório e biologia tumoral, o que a torna relevante para dissecar vias que conectam a sinalização do cálcio à adaptação celular ao estresse. O estudo da perda ou desregulação de RGN pode elucidar mecanismos de senescência, capacidade de desintoxicação e reprogramação metabólica em modelos de células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SMP30 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RGN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RGN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RGN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SMP30.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RGN para a investigação da sinalização de SMP30, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RGN críticos para a função SMP30
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RGN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SMP30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SMP30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RGN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SMP30 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SMP30 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RGN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RGN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.