Date published: 2026-7-19

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SmcX双切口酶质粒(m): sc-423030-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • SmcX 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • SmcX双切酶质粒(m)和SmcX双切酶质粒(m2)编码针对Kdm5c的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:SmcX: sc-376255,通过WB, IF或者IHC分析
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    SmcX双切口酶质粒(m)

    sc-423030-NIC
    20 µg
    $410.00

    SmcX双切口酶质粒(m2)

    sc-423030-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    Kdm5c(SmcX)编码一种X染色体连锁的组蛋白赖氨酸去甲基化酶,可去除H3K4me2/3标记,从而在小鼠细胞中塑造转录程序并调控染色质可及性。SmcX通过调节RNA聚合酶II依赖的基因表达通路中的启动子与增强子活性,参与神经元发育、突触功能以及细胞命运决定的表观遗传调控。Kdm5c功能受损会改变活动依赖性的转录,并与神经发育相关表型有关,为研究由染色质驱动的认知与行为调控机制提供了切入点。此外,Kdm5c对分化过程及细胞周期相关转录的控制,也为探索不同组织情境下的特异性表观遗传重塑提供了研究基础。

    SmcX 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Kdm5c 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Kdm5c内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Kdm5c的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Kdm5c基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。